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Aiolos双切口酶质粒(h) | sc-400764-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Aiolos双切口酶质粒(h2) | sc-400764-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
IKZF3 编码 Aiolos(艾奥洛斯),它属于 Ikaros 家族的锌指转录因子,负责调控淋巴细胞成熟、免疫耐受以及 B 细胞分化所需的基因表达程序。Aiolos 可与染色质重塑以及转录抑制/激活复合体协同作用,从而调节抗原受体刺激及细胞因子驱动通路下游的信号输出。IKZF3 活性失调与淋巴细胞稳态改变、异常抗体反应以及免疫介导的病理生理过程相关,因此是研究造血谱系中转录调控的一个重要节点。作为核内调控因子,Aiolos 常在表观遗传调控、谱系决定以及免疫细胞信号网络等研究背景下被重点关注。
Aiolos 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IKZF3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IKZF3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IKZF3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IKZF3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。