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AIM2双切口酶质粒(m) | sc-436414-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 AIM2(absent in melanoma 2)是一种位于细胞质的双链 DNA 传感器,可通过与 ASC 组装 AIM2 炎性小体来启动先天免疫信号传导,进而激活 caspase-1,并促使 IL-1β 和 IL-18 成熟。AIM2 通过依赖炎性小体的焦亡及细胞因子释放,塑造抗微生物防御能力,并在髓系细胞与上皮细胞等区室中调控炎症基调。AIM2 的活性与 DNA 损伤以及宿主—病原体应答通路相互交叉,影响机体对来自微生物或受损细胞的细胞质 DNA 的反应。在临床前模型中,AIM2 炎性小体信号的失调与炎症和自身免疫表型,以及肿瘤相关炎症有关。
AIM2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Aim2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Aim2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Aim2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Aim2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。