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AID双切口酶质粒(h) | sc-401542-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
AID双切口酶质粒(h2) | sc-401542-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
AICDA 编码活化诱导型胞苷脱氨酶(AID),这是一种 DNA 编辑酶,在转录过程中可作用于单链 DNA,将胞嘧啶脱氨为尿嘧啶。在被激活的 B 细胞中,AID 通过将损伤(病变)形成与碱基切除修复和错配修复通路相耦联,启动免疫球蛋白基因的体细胞高频突变和类别转换重组,从而塑造抗体的亲和力与同种型。AID 活性若发生失调,可能引入靶外突变和染色体易位,使 AICDA 的异常与 B 细胞恶性肿瘤及其他 DNA 损伤信号异常情境下所见的基因组不稳定性相关。因此,AICDA 被广泛用于研究适应性免疫、诱变机制以及 DNA 修复通路选择。
AID 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 AICDA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对AICDA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏AICDA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了AICDA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。