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ADK双切口酶质粒(h) | sc-403273-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ADK双切口酶质粒(h2) | sc-403273-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
腺苷激酶(ADK)是嘌呤补救途径的关键调控因子,可将腺苷磷酸化为 AMP,从而控制细胞内腺苷的可用性并影响腺苷酸库。通过调节腺苷代谢,ADK 会影响能量稳态以及与核苷酸周转和应激反应相关的信号过程。ADK 活性的改变可重新平衡腺苷依赖性通路,进而影响炎症、神经调制信号传导和细胞兴奋性,因此与神经系统及代谢表型研究密切相关。在人类系统中,ADK 常被用作一个关键节点,用于探究嘌呤代谢如何在缺氧、氧化应激或线粒体功能改变等条件下与细胞状态变化发生关联。
ADK 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ADK 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ADK内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ADK的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ADK基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。