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Adducin α双切口酶质粒(h) | sc-401693-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Adducin α双切口酶质粒(h2) | sc-401693-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ADD1 编码加肌动蛋白 α(adducin α),这是一种膜骨架蛋白,能够封端并束集肌动蛋白丝,促进细胞皮层处谱蛋白–肌动蛋白网络的组装。通过调控细胞骨架组织、细胞形态和膜稳定性,加肌动蛋白 α 参与细胞黏附、细胞运动,以及红细胞和其他细胞类型的力学韧性等过程。其活性受磷酸化依赖的信号通路调节,包括蛋白激酶 C(PKC)与 Rho 家族通路,这些通路可精细调控肌动蛋白重塑与皮层张力。ADD1 相关的细胞骨架动力学失衡已在研究中与膜性质改变及血压相关表型联系起来,因此 ADD1 也被视为机械生物学与血管细胞研究中的一个潜在靶点。
Adducin α 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ADD1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ADD1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ADD1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ADD1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。