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ADAR2双切口酶质粒(h) | sc-401166-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ADAR2双切口酶质粒(h2) | sc-401166-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ADARB1 编码 ADAR2,这是一种作用于 RNA 的腺苷脱氨酶,可在双链 RNA 结构内催化 A→I 编辑,从而改写转录本编码并重塑 RNA 二级结构。ADAR2 的活性在神经系统中尤为突出,影响离子通道及神经递质传递相关 mRNA,将 RNA 编辑与兴奋性、突触信号以及神经元发育联系起来。除"改码"作用外,ADAR2 还可调控 RNA 稳定性与剪接位点选择,并通过改变原本会被模式识别受体识别的 dsRNA 底物来微调先天免疫感知。ADAR2 依赖的编辑模式失调与多种神经系统疾病机制相关,也在癌症与炎症等背景下被研究,因为 RNA 编辑可重塑基因调控网络。
ADAR2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ADARB1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ADARB1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ADARB1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ADARB1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。