ADAMDEC1CRISPR激活质粒(h): sc-405515-ACT

ADAMDEC1 编码一种分泌型金属蛋白酶，属于 ADAM（去整合素与金属蛋白酶）家族，参与细胞外基质重塑并调控细胞周围的蛋白水解过程。它主要与髓系及黏膜免疫相关组织区室有关，并被认为与炎症信号传导、白细胞分化以及组织监视等过程相关。通过调节细胞外环境，ADAMDEC1 可影响细胞迁移、黏附动态，以及塑造局部免疫反应的细胞因子应答通路。多项关于胃肠道炎症、肿瘤微环境生物学和免疫浸润的研究报道了 ADAMDEC1 表达的改变，支持其作为免疫学与肿瘤研究中分子读数指标的价值。

ADAMDEC1 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性ADAMDEC1的表达。

ADAMDEC1 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的ADAMDEC1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于ADAMDEC1转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性ADAMDEC1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的ADAMDEC1位点，并能够研究内源性位点上依赖于ADAMDEC1的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在ADAMDEC1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟ADAMDEC1通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。