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ACE2慢病毒激活颗粒(m) | sc-427594-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
小鼠 Ace2 编码血管紧张素转化酶 2(ACE2),这是一种 I 型膜锌金属肽酶,通过将血管紧张素 II 转化为血管紧张素-(1–7) 来拮抗肾素–血管紧张素系统的作用。通过调节 ACE/ACE2 信号传导,ACE2 会影响与 GPCR(G 蛋白偶联受体)相关的通路,这些通路调控血管张力、炎症信号、氧化应激反应以及组织重塑。ACE2 在上皮与内皮等细胞区室中广泛表达,并参与心血管、肾脏和肺部生理功能的稳态控制。ACE2 表达或活性改变与心代谢功能障碍、炎症性肺损伤以及宿主–病原体相互作用相关,因此是研究疾病相关通路机制的重要靶点。
ACE2 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Ace2 表达。
ACE2 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Ace2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性ACE2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Ace2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。