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ACAT-1慢病毒激活颗粒(h) | sc-402300-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
ACAT1 编码乙酰辅酶A乙酰转移酶1(ACAT-1),这是一种线粒体硫解酶,催化两分子乙酰辅酶A可逆缩合生成乙酰乙酰辅酶A,从而支持酮体利用以及支链氨基酸分解代谢。通过调控线粒体内乙酰辅酶A的通量,ACAT-1 有助于在营养压力条件下协调氧化代谢、氧化还原平衡与底物选择。ACAT1 相关通路的失调与酮体和氨基酸代谢的先天性缺陷有关,并与神经发育及神经代谢表型相关的线粒体代谢状态改变相关。ACAT-1 的功能也常在线癌症与免疫细胞代谢重编程研究中被重点探究,因为线粒体碳流向会影响细胞增殖与分化程序。
ACAT-1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 ACAT1 表达。
ACAT-1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在ACAT1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性ACAT-1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 ACAT1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。