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ACAD-11CRISPR激活质粒(h) | sc-408606-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
人类 ACAD11 基因编码酰基辅酶 A 脱氢酶家族成员 11(ACAD-11),这是一种线粒体酶,通过对特定酰基辅酶 A(acyl‑CoA)底物进行 FAD 依赖性的脱氢反应,参与脂肪酸 β‑氧化的起始步骤。ACAD-11 通过促进线粒体脂质分解代谢,影响细胞能量平衡、氧化还原稳态以及与 PPAR 调控的代谢程序相交叉的脂质信号通路。因此,ACAD11 表达或活性发生改变,与线粒体功能障碍、脂质堆积以及代谢应激反应等研究密切相关。在生物医学研究中,ACAD11 常用于探讨脂肪酸氧化能力与炎症、神经生物学以及代谢性疾病相关表型之间的联系。
ACAD-11 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性ACAD11的表达。
ACAD-11 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的ACAD11基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于ACAD11转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性ACAD-11表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的ACAD11位点,并能够研究内源性位点上依赖于ACAD-11的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在ACAD11表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟ACAD-11通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。