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ABHD5双切口酶质粒(h) | sc-402273-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ABHD5双切口酶质粒(h2) | sc-402273-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ABHD5(又称 CGI-58)编码一种与脂滴相关的共激活因子,可刺激脂肪组织甘油三酯脂肪酶(PNPLA2/ATGL),促进细胞内甘油三酯水解。ABHD5 通过调控脂解作用、脂肪酸动员以及脂滴动态变化,影响能量稳态,并参与与线粒体 β-氧化和细胞应激反应相关的下游信号通路。ABHD5 依赖的脂质分解代谢一旦受损,常与中性脂质储存表型相关,并被认为与影响肝脏、皮肤和肌肉组织的代谢失衡有关。作为脂质代谢中的关键枢纽,ABHD5 常在脂质储存性疾病、炎症相关的代谢通路以及细胞类型特异性的脂滴重塑等研究背景下受到关注。
ABHD5 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ABHD5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ABHD5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ABHD5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ABHD5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。