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ABHD14B慢病毒激活颗粒(h) | sc-410211-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
ABHD14B(含 ABHD 水解酶结构域的蛋白 14B)编码一种丝氨酸水解酶家族蛋白,通过水解酯键/酰胺键参与调控细胞脂质及小分子代谢。作为 α/β-水解酶折叠超家族成员,ABHD14B 可能影响代谢稳态、细胞器相关的脂质处理,以及与应激反应和炎症通路相交汇的下游信号过程。ABHD 家族酶的表达与功能变异与生物能量学改变和膜脂重塑有关,而这些特征常见于代谢功能障碍及与癌症相关的细胞状态。因此,ABHD14B 为在人源细胞模型中开展机制研究提供了一个可操作的关键节点,用于连接水解酶活性与通路层面的表型。
ABHD14B 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 ABHD14B 表达。
ABHD14B 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在ABHD14B转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性ABHD14B表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 ABHD14B 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。