The Double Nickase Plasmid features a U6 promoter for sgRNA expression, a 20 nt targeting sequence, and a gRNA scaffold to guide Cas9n. It includes a CBh promoter for Cas9n (D10A) and puromycin resistance, GFP for transfection verification, and nuclear localization signals (NLS). The 2A peptide allows co-expression of Cas9n and Puro from a single promoter, enabling precise genome editing with reduced off-target effects.
ABCD1双切口酶质粒(h): sc-405301-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ABCD1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- ABCD1双切酶质粒（h）和ABCD1双切酶质粒（h2）编码针对ABCD1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ABCD1双切口酶质粒(h) | sc-405301-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ABCD1双切口酶质粒(h2) | sc-405301-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ABCD1 编码一种定位于过氧化物酶体的 ATP 结合盒（ABC）转运蛋白，负责将超长链脂肪酰辅酶 A（VLCFA acyl‑CoA）导入过氧化物酶体进行 β‑氧化，从而帮助维持脂质稳态与膜成分。通过参与过氧化物酶体脂肪酸分解代谢，ABCD1 与调控氧化还原平衡、线粒体–过氧化物酶体代谢耦联以及与脂质堆积相关的炎症信号通路相互交织。人类 ABCD1 的功能缺失变异与 X 连锁肾上腺脑白质营养不良有关；在该疾病中，过氧化物酶体对 VLCFA 的降解受损会导致 VLCFA 升高，并引发一系列下游细胞应激表型。因此，干扰 ABCD1 常被用于在相关细胞类型中建立过氧化物酶体功能障碍及脂质驱动的细胞病理模型。
ABCD1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ABCD1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ABCD1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ABCD1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ABCD1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。