Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
53BP1 Antibody (6B3E10): sc-517281. Western blot analysis of 53BP1 expression in Ramos (A), HeLa (B) and U-2 OS (C) whole cell lysates.
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53BP1双切口酶质粒(h): sc-400321-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- 53BP1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- 53BP1双切酶质粒（h）和53BP1双切酶质粒（h2）编码针对TP53BP1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：53BP1: sc-515841，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
53BP1双切口酶质粒(h) | sc-400321-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
53BP1双切口酶质粒(h2) | sc-400321-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
TP53BP1 编码 53BP1，这是一种与染色质相关的 DNA 损伤应答因子。它通过识别组蛋白标记并与 ATM 等上游传感器协同作用，在 DNA 双链断裂处富集。53BP1 促进非同源末端连接（NHEJ），并限制 DNA 末端切除，从而在与 BRCA1 依赖的同源重组（HR）相对抗的过程中影响修复通路的选择。通过这些作用，它有助于维持基因组稳定性、支持 S 期进程与检查点信号传导；其失调与多种癌症背景下观察到的突变负荷增加和染色体重排有关。TP53BP1 也常被用作 DNA 损伤焦点形成及修复能力的功能性读出指标，广泛应用于复制压力与基因毒性应答研究中。
53BP1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 TP53BP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TP53BP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏TP53BP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了TP53BP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。