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4.1R双切口酶质粒(h) | sc-402889-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
4.1R双切口酶质粒(h2) | sc-402889-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
EPB41 编码蛋白 4.1R,这是一种膜–细胞骨架连接适配蛋白,可稳定谱蛋白(spectrin)–肌动蛋白(actin)网络,并在质膜处组织多蛋白复合物。4.1R 有助于维持红细胞的机械完整性,同时也通过与膜蛋白及支架蛋白相互作用,调控皮质肌动蛋白动态、细胞形态、黏附与信号传导。通过调节细胞骨架结构与膜稳定性,EPB41 影响机械转导和细胞迁移等过程。EPB41/4.1R 功能受扰与红细胞膜脆弱等表型相关,并常在与细胞骨架失调有关的血液学及更广泛的细胞生物学模型中被研究。
4.1R 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 EPB41 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EPB41内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏EPB41的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了EPB41基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。