Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
3β-HSD Antibody (37-2): sc-100466. Western blot analysis of 3β-HSD expression in non-transfected: sc-117752 (A) and human 3β-HSD transfected: sc-173046 (B) 293T whole cell lysates.
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3β-HSD双切口酶质粒(h): sc-400825-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- 3β-HSD 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- 3β-HSD双切酶质粒（h）和3β-HSD双切酶质粒（h2）编码针对HSD3B1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
3β-HSD双切口酶质粒(h) | sc-400825-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
3β-HSD双切口酶质粒(h2) | sc-400825-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
HSD3B1 编码 3β-羟类固醇脱氢酶/Δ5-Δ4 异构酶 1 型（3β-HSD），这是一种微粒体酶，可通过将 Δ5-3β-羟类固醇转化为相应的 Δ4-酮类固醇产物来催化类固醇生成过程中的关键步骤，其中包括将孕烯醇酮转化为孕酮，以及将脱氢表雄酮转化为雄烯二酮。通过这些反应，它调控雄激素、雌激素、糖皮质激素和盐皮质激素生物合成通路中的代谢通量，并影响细胞内类固醇激素的可用性。HSD3B1 活性或表达的改变可导致细胞内分泌（intracrine）类固醇代谢发生偏移，因此常在激素依赖性信号传导与分化受到扰动的研究背景下被关注，包括内分泌与生殖生物学以及激素反应性疾病模型等。
3β-HSD 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 HSD3B1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HSD3B1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏HSD3B1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了HSD3B1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。