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11β-HSD2双切口酶质粒(h) | sc-401400-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
11β-HSD2双切口酶质粒(h2) | sc-401400-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
HSD11B2 编码人11β-羟类固醇脱氢酶2型(11β-HSD2),这是一种依赖 NAD+ 的氧化还原酶,可将皮质醇失活转化为可的松,从而保护盐皮质激素受体信号免受糖皮质激素过量的影响。该酶是类固醇激素受体前代谢的关键决定因素,并在对盐皮质激素反应的上皮组织(包括肾脏和结肠)的电解质稳态维持中发挥作用。HSD11B2 表达或活性改变与皮质类固醇信号失调以及与"表观盐皮质激素过多症"一致的表型相关,因此与高血压生物学和内分泌调控研究密切相关。11β-HSD2 也在胎盘和血管组织中受到研究,用以阐明其在塑造局部糖皮质激素暴露及下游转录程序中的作用。
11β-HSD2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HSD11B2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HSD11B2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HSD11B2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HSD11B2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。