Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
μ-protocadherin CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-406015
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- μ-protocadherin CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在μ-protocadherin基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：µ-protocadherin: sc-166953，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
μ-protocadherin CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-406015 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
CDHR5 编码 μ-原钙黏蛋白（μ-protocadherin），这是一种钙依赖性的细胞–细胞黏附分子，在上皮组织中富集，在其中参与顶端连接的组织、细胞极性维持以及屏障完整性。通过同源性相互作用，并与细胞骨架及连接复合体相联结，μ-原钙黏蛋白有助于协调上皮形态发生以及接触依赖性的信号传导，从而影响细胞分化与组织结构。CDHR5 表达的改变与上皮重塑以及胃肠道和其他上皮相关病理中所见的黏附程序失调有关。作为一种细胞表面黏附受体，CDHR5 常在研究连接稳定性、上皮可塑性以及微环境依赖表型的工作中被重点关注。
μ-protocadherin CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中CDHR5基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对CDHR5基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏CDHR5开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使μ-protocadherin蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建CDHR5缺失的细胞模型，用于μ-protocadherin信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 μ-protocadherin 功能至关重要的 CDHR5 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 CDHR5 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 μ-protocadherin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 μ-protocadherin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 CDHR5 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 μ-protocadherin HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 μ-protocadherin HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由CDHR5同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定CDHR5靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。