β ig-h3双切口酶质粒(m): sc-423369-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- β ig-h3 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- β ig-h3双切酶质粒（m）和β ig-h3双切酶质粒（m2）编码针对Tgfbi的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
β ig-h3双切口酶质粒(m) | sc-423369-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
Tgfbi 编码 β ig-h3（TGFBI），这是一种由 TGF-β 信号诱导分泌的细胞外基质（ECM）蛋白，可通过与整合素及基质结构成分相互作用，调控细胞—基质黏附、迁移和组织重塑。在小鼠体系中，β ig-h3 参与细胞外基质的组织构建、与创伤修复相关的过程，并调节上皮细胞和基质细胞的行为，使其与黏着斑信号通路、TGF-β 驱动的纤维化反应等路径相关联。TGFBI 的表达或基质沉积异常常在病理性重塑背景下被研究，包括类似纤维化的表型以及肿瘤微环境变化；在这些情况下，ECM 组成会影响侵袭行为和免疫细胞迁移。上述特点使 Tgfbi 成为解析 TGF-β 调控的 ECM 蛋白如何塑造组织结构与力学生物学特性的有用靶点。
β ig-h3 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Tgfbi 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Tgfbi内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Tgfbi的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Tgfbi基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。