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β-FR双切口酶质粒(h) | sc-403346-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
β-FR双切口酶质粒(h2) | sc-403346-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
FOLR2 编码叶酸受体β(β-FR),这是一种通过糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定于细胞表面的受体,可与还原型叶酸结合并介导受体依赖性的摄取,从而支持一碳代谢。通过调节细胞内叶酸的可用性,β-FR 影响核苷酸生物合成以及对增殖与分化程序至关重要的甲基化反应。FOLR2 在髓系谱系细胞中表达富集,尤其是在某些组织巨噬细胞亚群中,这使其表达与免疫细胞的激活状态及微环境重塑相关联。FOLR2 表达改变与炎症生物学以及多种疾病背景下观察到的巨噬细胞相关特征有关,因此可作为有用的标志物与机制研究中的功能节点。
β-FR 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 FOLR2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FOLR2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏FOLR2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了FOLR2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。