非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
β-1,4-Gal-T1双切口酶质粒(h): sc-403299-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- β-1,4-Gal-T1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- β-1,4-Gal-T1双切酶质粒（h）和β-1,4-Gal-T1双切酶质粒（h2）编码针对B4GALT1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：β-1,4-Gal-T1: sc-515551，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
β-1,4-Gal-T1双切口酶质粒(h) | sc-403299-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
β-1,4-Gal-T1双切口酶质粒(h2) | sc-403299-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
B4GALT1 编码人源 β-1,4-半乳糖基转移酶 1（β-1,4-Gal-T1），这是一种定位于高尔基体的糖基转移酶，可将半乳糖转移到 N-乙酰氨基葡萄糖上，在 N-连接和 O-连接糖链以及糖脂上生成 Galβ1-4GlcNAc（LacNAc）结构。该酶活性支持分泌途径内糖链的成熟，并塑造细胞表面糖基化模式，从而影响蛋白质折叠与转运、受体信号传导以及细胞–细胞或细胞–基质相互作用。β-1,4-Gal-T1 的功能还与凝集素结合、免疫识别和细胞外基质重塑等依赖糖基化的过程相交织。B4GALT1 活性及 LacNAc 丰度的改变，已与多种疾病相关情境中观察到的糖蛋白功能失调有关，包括先天性糖基化障碍以及与恶性肿瘤相关的糖组变化。
β-1,4-Gal-T1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 B4GALT1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对B4GALT1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏B4GALT1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了B4GALT1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。