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α1A-AR双切口酶质粒(h) | sc-401726-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
α1A-AR双切口酶质粒(h2) | sc-401726-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ADRA1A 编码人类 α1A 肾上腺素能受体(α1A-AR),这是一类 G 蛋白偶联受体(GPCR),主要与 Gq/11 偶联,从而激活磷脂酶 C 信号通路、促进依赖肌醇三磷酸(IP3)的 Ca2+ 动员,并激活蛋白激酶 C(PKC)。通过这些通路,α1A-AR 调控平滑肌收缩、血管张力以及神经递质传递,并进一步影响 MAPK/ERK 信号及更广泛的转录反应。ADRA1A 的表达与信号传导平衡参与肾上腺素能对心血管与泌尿生殖系统生理的调控;其失调与交感神经信号改变及组织重塑相关的疾病具有一定关联。作为一种位于细胞表面的 GPCR,且其第二信使输出明确,α1A-AR 常被用于研究受体去敏化、偏向性信号传导,以及与其他 GPCR 和生长因子通路之间的串话。
α1A-AR 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ADRA1A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ADRA1A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ADRA1A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ADRA1A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。