非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
FR 抗体 (E-11): sc-515521. HL-60 (A) 和 C6 (B) 全细胞裂解液中 FR 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
α-FR双切口酶质粒(h): sc-400909-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- α-FR 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- α-FR双切酶质粒（h）和α-FR双切酶质粒（h2）编码针对FOLR1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
α-FR双切口酶质粒(h) | sc-400909-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
α-FR双切口酶质粒(h2) | sc-400909-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
FOLR1 编码叶酸受体 α（α-FR），这是一种通过糖基磷脂酰肌醇（GPI）锚定于细胞表面的蛋白质，能够以高亲和力结合叶酸，并通过促进叶酸摄取来支持细胞的一碳代谢。α-FR 通过调控细胞内叶酸的可利用性，影响核苷酸生物合成、甲基化反应以及氧化还原稳态，从而与上皮组织中的增殖能力和代谢状态相联系。FOLR1 的表达在具有上皮谱系特征的癌症中常发生改变，同时也与依赖叶酸的发育过程和神经生物学过程相关。作为一种具有内吞转运特性的膜受体，α-FR 为在人类细胞模型中研究营养物质转运、受体回收以及代谢适应提供了一个便于操作的切入点。
α-FR 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 FOLR1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FOLR1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏FOLR1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了FOLR1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。