α-actinin-1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m2): sc-430958-KO-2

概述

Actn1 编码 α-辅肌动蛋白-1（α-actinin-1），这是一种对 Ca2+ 不敏感的肌动蛋白结合蛋白，能够交联丝状肌动蛋白（F-actin），并组织皮质肌动蛋白网络、应力纤维以及与黏附相关的细胞骨架结构。在小鼠细胞中，α-辅肌动蛋白-1 通过协调肌动蛋白重塑与 Rho 家族 GTP 酶等信号枢纽的作用，支持整合素连接的黏着斑动态变化、机械信号转导以及细胞迁移。由于其在维持细胞骨架张力与膜稳定性方面的作用，ACTN1 与血小板生成和止血功能研究密切相关；在这些过程中，肌动蛋白结构的改变可能扰乱前血小板形成并削弱细胞骨架的韧性。α-辅肌动蛋白-1 功能失调与遗传性血小板疾病以及更广泛的涉及黏附与组织结构的表型有关，因此 Actn1 是用于构建细胞骨架驱动的疾病机制模型的有用靶点。

α-actinin-1 CRISPR/Cas9 KO质粒（m2）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Actn1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Actn1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Actn1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使α-actinin-1蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建Actn1缺失的细胞模型，用于α-actinin-1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 α-actinin-1 功能至关重要的 Actn1 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 Actn1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 α-actinin-1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 α-actinin-1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Actn1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 α-actinin-1 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 α-actinin-1 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Actn1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Actn1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。