Mucin 4 CRISPR Activation Plasmid (h): sc-400329-ACT. Western blot analysis of Mucin 4 expression in non-transfected control (A) and Mucin 4 CRISPR Activation Plasmid transfected (B) HEK293T whole cell lysates. Blot probed with Mucin 4 (1G8): sc-33654. α-actinin (H-2): sc-17829 used as specificity and loading control.
Mucin 4/MUC4 CRISPR プラスミド (h)
- 対象生物種: human
- CRISPR/Cas9 KOプラスミドは、GeCKO (v2) libraryに由来するMucin 4/MUC4-20ntのガイドRNAから構成されます。
- gRNAシークエンスは、ゲノムDNA中の部位特異的な二本鎖切断（DSB）を誘導するためにCas9蛋白質を指示します。
- ターゲット特異的なCRISPRノックアウト及び activationプラスミドを提供しています。詳しい製品情報につきまして、以下のタブをご覧ください。
- 遺伝子ノックアウトまたは活性化効果は、Mucin 4/MUC4 抗体 (1G8): sc-33654によって検定されることができます。
- 全製品はトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNAとして提供します。ただし、トランスフェクション困難な細胞との使用のため、Lentiviral Activation Particlesはレンチウイルス粒子に前もって包装されました。
クイックリンク
注文情報
CRISPR/Cas9 KO Plasmid
HDR Plasmid
Double Nickaseプラスミド
CRISPR Activationプラスミド
お奨めのコントロール製品
関連項目
Mucin 抗体、Mucin CRISPR製品に対する細胞応答の分析用
CRISPRシステムの詳細につきまして、ここをクリックしてください
CRISPR/ Cas9 KOプラスミド、Double NickaseプラスミドおよびCRISPR/ dCas9 Activationプラスミドは "Licensed Product" とみなされ、Limited Licenseに従って使用されるべきです詳細はこちらをクリックしてください。
Description
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Mucin 4/MUC4 CRISPR/Cas9 ノックアウト（KO）プラスミド (h2)はCas9 nucleaseと最大な効率のために設計されるターゲット特異的な20ntガイドRNA（gRNA）をエンコード化した3つのプラスミドのプールから構成されます。
- gRNAシークエンスは、GeCKO (v2) libraryに由来して、ゲノムDNA中の部位特異的な二本鎖切断（DSB）を誘導するためにCas9蛋白質を指示します。
- Cas9誘発されたDSBを含める細胞選択のため、Mucin 4/MUC4 HDR プラスミド (h2) (sc-400329-HDR-2)と同時にトランスフェクション（co-transfection）をお勧めいたします。
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: Mucin 4/MUC4 抗体 (1G8): sc-33654
見る プロトコル オンライン.
Description
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Mucin 4/MUC4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h2)と同時にトランスフェクション（co-transfection）するため、Mucin 4/MUC4 HDRプラスミド (h2)をお勧めいたします。
- Mucin 4/MUC4 HDRプラスミド (h2)は、2－3種のプラスミドのプールから構成され、対応するMucin 4/MUC4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h2)によって切られたサイトと一致している相同組換え修復 (HDR) テンプレートを含みます。
- 各HDRプラスミドは、Cas9誘発される二本鎖DNA切断部位の周囲にゲノムDNAに特異的に結合するため、2つの800 bpの相同アームを含みます。
- 各HDRプラスミドは安定したノックアウト（KO）細胞の選択を可能にするためのピューロマイシン耐性遺伝子、および視覚的にトランスフェクションを確認するためのRFP（赤色蛍光タンパク質）遺伝子を挿入します。
- Cre Vector sc-418923によるさらなる処理を可能にするため、各ピューロマイシン耐性遺伝子とRFP遺伝子は、2つのLoxPサイトが側面に並んでいます。
見る プロトコル オンライン.
Description
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Mucin 4/MUC4 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Mucin 4/MUC4 Double Nickaseプラスミド (h2)によってコードするペアリングgRNAsはMucin 4/MUC4 Double Nickaseプラスミド (h)のペアリングgRNAsと異なります。
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: Mucin 4/MUC4 抗体 (1G8): sc-33654
見る プロトコル オンライン.
Description
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Mucin 4/MUC4 CRISPR Activationプラスミド (h)は、特異的に遺伝子の発現量を増加させるため、相乗的活性化メディエーター(SAM)転写活性化システムです。
- Mucin 4/MUC4 CRISPR Activationプラスミド (h)は、1:1:1の質量比で以下の3つのプラスミドがら成る：トランス活性化ドメインVP64に溶解する非活性化されたCas9 (dCas9)ヌクレアーゼ(D10A と H840A)をコード化したのプラスミド（ブラストサイジン耐性遺伝子を含めて）、MS2-p65-HSF1融合蛋白質をコード化したのプラスミド（ハイグロマイシン耐性遺伝子を含めて）、2つのMS2 RNAアプタマーに溶解する目標特異的な20ntガイドRNAをコード化したのプラスミド（ピューロマイシン耐性遺伝子を含めて）。
- 得られたSAM複合体は、部位特異的な約200-250nt転写開始点の上流の領域に結合し、転写因子の強いリクルートメントを提供し、遺伝子の高い活性化効果が得られます。
- トランスフェクションの後、遺伝子活性化効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: Mucin 4/MUC4 抗体 (1G8): sc-33654
見る プロトコル オンライン.
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Mucin 4/MUC4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h2) | sc-400329-KO-2 | 20 µg | RMB2986.00 | |||
Mucin 4/MUC4 HDRプラスミド (h2) | sc-400329-HDR-2 | 20 µg | RMB3347.00 | |||
Mucin 4/MUC4 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-400329-NIC | 20 µg | RMB3084.00 | |||
Mucin 4/MUC4 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-400329-NIC-2 | 20 µg | RMB3084.00 | |||
Mucin 4/MUC4 CRISPR Activationプラスミド (h) | sc-400329-ACT | 20 µg | RMB2986.00 |