TMB Substrate Buffer, 1X

El tampón de sustrato TMB (3,3',5,5'-Tetrametilbencidina), normalmente suministrado como solución 1X lista para usar, se emplea ampliamente en ensayos bioquímicos, particularmente en ensayos inmunoenzimáticos (ELISA). El papel principal de TMB en estos ensayos es como sustrato cromogénico para la enzima peroxidasa de rábano picante (HRP), que a menudo se conjuga con anticuerpos en estas pruebas. El mecanismo de acción del Tampón Sustrato TMB implica la conversión enzimática del TMB por la HRP en un producto coloreado. Inicialmente, el TMB es incoloro, pero al ser oxidado por la HRP en presencia de peróxido de hidrógeno (H₂O₂), se transforma en una forma oxidada azul. La intensidad del color azul producido es directamente proporcional a la cantidad de enzima presente y, en consecuencia, a la cantidad del antígeno diana en el ensayo. Este cambio colorimétrico es cuantificable mediante espectrofotometría, normalmente a una longitud de onda de 650 nm para la forma azul. Para aumentar la sensibilidad, la reacción puede detenerse con un ácido, como el sulfúrico o el clorhídrico, que cambia el color azul a amarillo, medible a 450 nm. Este cambio no sólo amplifica la señal, sino que también la estabiliza, permitiendo lecturas más precisas. En investigación, el tampón de sustrato TMB se valora por su alta sensibilidad y especificidad. Permite la detección y cuantificación de diversas moléculas biológicas, como hormonas, proteínas y anticuerpos, lo que lo hace indispensable en la investigación diagnóstica, el análisis cuantitativo y cualitativo de biomarcadores y otras aplicaciones diversas en las que se requiere una medición precisa de las interacciones biológicas. La formulación lista para usar del tampón de sustrato 1X TMB simplifica la configuración del ensayo, garantizando la coherencia y fiabilidad en todos los experimentos.