Cada producto de plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) consiste en un conjunto de 3 plásmidos diseñados para asegurar la identificación y la escisión de un gen específico para una máxima eficiencia de knockout. Cada plásmido codifica una secuencia única de 20 nt derivada de la biblioteca GeCKO (v2).
Plásmidos CRISPR beta Actin (h)
- Especies objetivo: human; para el producto correspondiente mouse, consulte beta Actin CRISPR Plasmids (m)
- Los plásmidos consisten en beta Actin una guia especifica de ARN de 20 nt, obtenida de la libreria GeCKO (v2)
- las secuencias del gRNA dirigen a la proteina Cas9 para que genere un corte de doble cadena (DSB) especificamente en el ADN del gen
- Hay disponibles plásmidos CRISPR específicos de dianas tanto para la inactivación como para la activación de genes. Consulte la información detallada del producto en las pestañas a continuación
- El knockdown y la activación génica pueden comprobarse utilizando: beta Actin Anticuerpo (C4): sc-47778
- Todos los productos se proporcionan listos para usar, plásmidos purificados de ADN, excepto las Partículas Lentivirales que son envasadas como Párticulas Lentivirales para usar con células dificiles de transfectar.
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CRISPR/Cas9 KO Plasmid
HDR Plasmid
Plásmidos Doble Nickase
Plásmido Activador CRISPR
Partículas Lentivirales de Activación
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Los plásmidos RISPR/Cas9 KO, Plásmidos Doble Nickase y Plásmidos de Activación CRISPR/dCas9 se consideran productos "Licensed Product" y se utilizarán de acuerdo con la Licencia/Etiqueta Limitada haga click aquí.
Description
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- beta Actin Plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) consiste en un conjunto de tres plásmidos, cada uno expresa una nucleasa Cas9 y una beta Actin- guia de RNA de 20 nt (gRNA) diseñada para aumentar la eficiencia del Knockout
- Las secuencias del gRNA provienen de la biblioteca genómica GeCKO (v2) y dirigen a la proteína Cas9 para producir la rotura de la doble cadena (DSB) en el ADN genómico (%link_11%)
- Para seleccionar las células con el corte en la doble cadena, inducido por Cas9, se recomienda la co-transfección con beta Actin Plásmido HDR (h2) (sc-400000-HDR-2)
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: beta Actin Anticuerpo (C4): sc-47778
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- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- beta Actin Plásmido HDR (h2) está recomendado para co -transfectar con beta Actin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2)
- beta Actin Plásmido HDR (h2) es un conjunto de 2-3 plásmidos, cada uno contienen una una plantilla para la Reparación del ADN por Homología Dirigida (HDR) correspondientes a los cortes generados por beta Actin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2)
- Cada plantilla HDR contiene dos brazos homólogos de 800 pares de bases, diseñados para unirse específicamente al ADN genómico que rodea el corte inducido por Cas 9
- Cada plásmido HDR inserta un gen de resistencia a puromicina para permitir la selección de células con knockout (KO) y RFP (Proteína Roja Fluorescente) para verificar visualmente la transfección
- La resistencia a Puromicina y el gen RFP están flanqueados por dos sitios LoxP, para permitir un posterior procesamiento con el Cre Vector sc-418923
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- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)beta Actin consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- Los ARN guía codificados en el Plásmido Doble Nickase (h2 )beta Actin son diferentes del par codificado en Plásmido Doble Nickase (h)
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: beta Actin Anticuerpo (C4): sc-47778
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- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmdo de Activación CRISPR (h) beta Actin es un sistema de activación de la trascripción mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen concreto
- Los Plásmdo de Activación CRISPR (h) beta Actin incluyen los siguientes tres plásmidos, con un radio 1:1:1: plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada (dCas9), (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64 y el gen de resistencia a blasticidina; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y el gen de resistencia a Higromicina; plásmido codificador de la secuencia diana específica de 20 nt de ARN y el gen de resistencia a puromicina.
- El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación genica.
- Tras la transfección, la eficacia de la activación génica puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: beta Actin Anticuerpo (C4): sc-47778
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- 200 µl de Partículas Lentivirales de Activación CRISPR/dCas listas para usar
- Partículas Lentivirales de Acitvación (h) beta Actin es un sistema de activación de la trascripción por mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen determinado a través de la tranducción lentiviral de las células
- Partículas Lentivirales de Acitvación (h) beta Actin incluyen los siguientes elementos activadores SAM: plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada, (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y un plásmido que codifica la secuencia de diana específica de 20 nt de ARN. También contienen genes de resistencia a blasticidina, higromicina y puromicina.
- El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación génica
- El ARN guía de las Partículas Lentivirales de Activación (h2) beta Actin codifica una secuancia diana especifica de 20 nt, que es diferente del ARN guia de Partículas Lentivirales de Activación (h)
- Tras la transfección, la eficacia de la activación génica puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: beta Actin Anticuerpo (C4): sc-47778
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Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
beta Actin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-400000-KO-2 | 20 µg | RMB2933.00 | |||
beta Actin Plásmido HDR (h2) | sc-400000-HDR-2 | 20 µg | RMB3287.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h) beta Actin | sc-400000-NIC | 20 µg | RMB3023.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) beta Actin | sc-400000-NIC-2 | 20 µg | RMB3023.00 | |||
Plásmido CRISPR de Activación (h) beta Actin | sc-400000-ACT | 20 µg | RMB2933.00 | |||
Plásmido CRISPR de Activación (h2) beta Actin | sc-400000-ACT-2 | 20 µg | RMB2933.00 | |||
Partículas Lentivirales de Activación (h) beta Actin | sc-400000-LAC | 200 µl | RMB3362.00 | |||
Partículas Lentivirales de Activación (h2) beta Actin | sc-400000-LAC-2 | 200 µl | RMB3362.00 |